PC 抽提是去除蛋白質(zhì)有效的手段,但超過了該飽和度,裂解體系中的蛋白質(zhì)不會被一次去除,必須靠多次抽提,方可*去除。且每次抽提都會損失部分核酸。另外,體系太粘稠的壞處是,蛋白質(zhì)難以*去除,以及基因組 DNA 會斷裂得更厲害,所以要注意裂解液與樣品的比例。PC 抽提的另外一個用途是,利用酸性酚可以部分去除 DNA 的特點,在 RNA 抽提時獲得 DNA 殘留極少的 RNA。不過有一點要提醒的是,某些植物樣品,在去除某些雜質(zhì)之前,是不能使用 PC 抽提的,否則核酸必定降解。PC抽提的優(yōu)勢是成本低廉,對實驗條件要求較低,對于經(jīng)費緊張的實驗室較為實用。
二、高鹽沉淀法
高鹽沉淀蛋白質(zhì)/醇沉淀方法,同樣也是一個非常不錯的方法。與 PC 抽提方法相比,除了純度的穩(wěn)定性可能要低一點外,該方法幾乎克服了 PC 抽提的所有缺點。更快、更輕松的去除蛋白質(zhì)所可以用于大規(guī)模抽提,但其不足之處是純度 (蛋白質(zhì)殘留) 不夠穩(wěn)定,蛋白質(zhì)的沉淀效率在4℃會更好一些。